三重PCR检测茄子青枯病菌、黄萎病菌和白绢病菌

邹芬; 何烈干; 李湘民; 黄瑞荣; 马辉刚; 《植物保护学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为快速、准确对田间茄子发病植株和土壤中3种土传病害的病原菌青枯病菌Ralstonia solanacearum、黄萎病菌Verticillium dahliae和白绢病菌Sclerotium rolfsii进行检测，筛选这3种病菌的特异性引物，建立这3种病菌的三重PCR检测体系，对其退火温度、引物浓度、10×PCR Buffer（Mg2+plus）、dNTP和Taq DNA聚合酶进行优化，对优化后体系的特异性和灵敏度进行检测，并利用优化体系对田间采集的病害样品和土壤样品进行检测。结果表明，在优化后的50μL三重PCR检测体系中，RS-1-F/RS-3-R、dllz1/dllz2和SRITSF/SRITSR引物的最佳浓度分别为0.16、0.16和0.28μmol/L,10×PCR Buffer（Mg2+plus）、dNTP和Taq DNA聚合酶体积分别为6、5和1μL，检测体系的最佳退火温度为54℃。按照优化后的反应条件能分别扩增出青枯病菌、黄萎病菌和白绢病菌3种病菌的特异条带，分别为716、350和500 bp，其他对照病菌无条带。该体系对病菌DNA检测灵敏度达到0.1 ng/μL。该检测体系对田间采集的病害样品和土壤样品中病菌的检出率达95%以上。

关键词： 茄子 土传病害 三重PCR 青枯病菌 黄萎病菌 白绢病菌