鸡传染性贫血病毒实时荧光RPA快速检测方法的建立

王冷眉; 万培伟; 韩旭; 易松强; 闫莹莹; 林翠; 《中国家禽 》 2025 北大核心

摘要：为建立一种简便、快速的鸡传染性贫血病毒（CIAV）检测方法，试验针对CIAV VP2基因序列设计了多组引物和探针，经过引物筛选及反应温度和时间的优化，建立了CIAV的实时荧光重组酶聚合酶扩增方法（RPA），并对该方法的特异性、敏感性及重复性进行评估，应用该方法与荧光定量PCR（q PCR）同时对50份临床样品进行检测，比较两种方法的符合率。结果显示：该方法可在39℃恒温条件下20 min内快速、准确地检出CIAV，与其他6种常见的禽类病原体如传染性法氏囊病病毒（IBDV）、马立克病病毒（MDV）、J亚群禽白血病病毒（ALV-J）、新城疫病毒（NDV）、禽传染性支气管炎病毒（IBV）、传染性喉气管炎病毒（ILTV）不存在交叉反应；该方法对质粒DNA的检测限为1×10～2 copies/μL；该方法检测50份临床样品中有9份阳性，与q PCR的检测结果一致。研究表明：建立的检测CIAV的RPA操作简单、反应灵敏、特异性高、检测结果可靠，可用于鸡传染性贫血的快速检测和流行病学调查。

关键词： 鸡传染性贫血病毒 VP2基因 重组酶聚合酶等温扩增技术 快速检测