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正交设计优化辣椒SRAP-PCR反应体系及引物筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 周坤华 1 ; 方荣 1 ; 陈学军 1 ; 缪南生 1 ; 王悟亮 1 ;

作者机构： 1.江西省农业科学院

关键词： 辣椒;SRAP;正交设计;体系优化;引物筛选

期刊名称： 江西农业大学学报

ISSN： 1000-2286

年卷期： 2010 年 32 卷 03 期

页码： 183-188+220

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以辣椒基因组DNA为模板,采用L16(45)正交试验设计,对SRAP反应体系中的5种关键因素(TaqDNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA)进行优化,结果表明,辣椒SRAP-PCR最佳反应体系为:TaqDNA聚合酶0.75 U、Mg2+0.6 mmol/L、dNTPs 0.2 mmol/L、引物0.8μmol/L、模板DNA 50 ng,总体积为10μL。运用该体系对辣椒3份种质材料进行验证,证明该体系稳定可靠,并从198个SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的35个引物组合。该体系的建立与多态性引物组合的筛选为SRAP标记技术在辣椒分子遗传学中的应用提供科学依据。

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