文献类型： 中文期刊

作者： 靳亮 ¹ ; 许翠萍 ² ; 王金昌 ¹ ; 关丽梅 ¹ ; 张稳超 ¹ ; 黄朝 ¹ ; 高学梅 ¹ ; 王洪秀 ³ ;

作者机构： 1.江西省科学院微生物研究所

2.鲁东大学生命科学学院

3.江西省农业科学院农业应用微生物研究所

关键词： 马尾松毛虫质型多角体病毒;NSP1;抗体制备;真核表达;细胞定位

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2016 年 32 卷 11 期

页码： 208-214

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 马尾松毛虫质型多角体病毒(Dendrolimus punctatus cytoplasmic polyhedrosis virus,Dp CPV)基因组S5片段编码一个由881个氨基酸组成、分子量为101 k D的非结构蛋白(NSP1)。为探寻Dp CPV NSP1蛋白的功能,将Dp CPV 1基因组S5-1片段的抗原区(1-600 bp)进行了原核表达,并将纯化蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。将稀释后的病毒液感染甜菜夜蛾幼虫,感染后每天解剖甜菜夜蛾并取中肠样品,通过Western blot检测NSP1蛋白的合成时间曲线。Western blot检测结果显示,S5片段表达的蛋白在病毒感染第1天就有合成,并且除了检测到全长的蛋白(101 k D)外,也检测到了80 k D和20 k D的蛋白条带,说明NSP1蛋白为早期表达蛋白,并且蛋白发生了切割。另外,首次对Dp CPV 1 S5片段进行了在昆虫细胞中表达和昆虫亚细胞定位,结果显示,昆虫细胞定位于细胞的细胞质。