文献类型： 中文期刊

作者： 彭晗 ¹ ; 王洪秀 ² ; 王金昌 ³ ; 关丽梅 ³ ; 靳亮 ³ ; 万翠香 ¹ ;

作者机构： 1.南昌大学生命科学与食品工程学院

2.江西省农业科学院农业应用微生物研究所

3.江西省科学院微生物研究所

关键词： 马尾松毛虫质型多角体病毒;多克隆抗体;真核表达;细胞定位

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2016 年 32 卷 03 期

页码： 122-128

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探寻马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV 1)p44蛋白的功能,构建了DpCPV 1基因组S8片段的原核表达体系,表达纯化蛋白后免疫家兔制备了多克隆抗体。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建了3种重组的杆状病毒质粒(Bacmid-p44、Bacmid-p44-e GFP和Bacmid-e GFP)。转染昆虫细胞Sf9进行表达,通过Western blot检测和蛋白的亚细胞定位观察。Western blot检测结果显示,Bacmid-S8在昆虫细胞Sf9中表达实际蛋白的大小为35 kD,比在原核系统中表达的蛋白(44 k D)略小;利用激光共聚焦显微镜观察p44-e GFP的融合蛋白的亚细胞定位发现,融合p44的绿色荧光蛋白(eGFP)主要聚集在细胞质中,而未融合的eGFP则分布于整个细胞,说明DpCPV 1的p44蛋白定位于细胞质中。