科研产出
嗜热自养甲烷杆菌二硫键异构酶活性位点特征
《应用与环境生物学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要:嗜热自养甲烷杆菌二硫键异构酶(Mt PDI)催化蛋白质二硫键的形成和异构化,具有分子伴侣活性,在宿主热损伤保护中具有关键性作用.为研究Mt PDI活性结构域中的关键氨基酸位点,通过生物信息学预测Mt PDI的活性结构域(C_(74)PAC_(77)),通过定点突变分析其对二硫键异构酶酶活性的影响.结果显示:Mt PDI活性结构域中C74、C77位点进行突变后,Mt PDI(C74S)、Mt PDI(C77S)、Mt PDI(C74S/C77S)的还原酶活性都明显降低,分别降低32.2%、40.7%和51.2%,双突变的酶活影响大于单点突变.热处理后,突变体Mt PDI(C74S)、Mt PDI(C77S)、Mt PDI(C74S/C77S)对大肠杆菌的热损伤保护明显低于Mt PDI.本研究表明C74和C77是自养甲烷杆菌二硫键异构酶活性区域关键氨基酸,可为深入研究嗜热古菌二硫键的功能和嗜热自养甲烷杆菌抗胁迫机理提供基础.
关键词: 嗜热自养甲烷杆菌 二硫键异构酶 点突变 还原酶活性 热耐受性
CRISPR/Cas9介导基因组编辑技术在植物基因中的研究进展
《江西农业大学学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术是在DNA双链的特定位置形成双链断裂,然后通过同源重组或非同源末端连接方式进行修复,造成基因组碱基局部缺失或插入而引起基因突变,它具有操作简单、突变效率高等优势。笔者归纳了CRISPR/Cas9系统的基本结构、分类及其在植物基因中的研究进展和未来的发展方向。
关键词: CRISPR/Cas9 基因组 同源重组 基因突变
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