文献类型： 中文期刊

作者： 刘松娇 ¹ ; 谢红卫 ² ; 毛立晖 ¹ ; 刘聪 ¹ ; 韦海波 ¹ ; 吴雨辰 ¹ ; 余扬帆 ¹ ; 丁霞 ¹ ;

作者机构： 1.null

2.江西省农业科学院

关键词： 嗜热自养甲烷杆菌;二硫键异构酶;点突变;还原酶活性;热耐受性

期刊名称： 应用与环境生物学报

ISSN： 1006-687X

年卷期： 2017 年 23 卷 05 期

页码： 862-865

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 嗜热自养甲烷杆菌二硫键异构酶(Mt PDI)催化蛋白质二硫键的形成和异构化,具有分子伴侣活性,在宿主热损伤保护中具有关键性作用.为研究Mt PDI活性结构域中的关键氨基酸位点,通过生物信息学预测Mt PDI的活性结构域(C_(74)PAC_(77)),通过定点突变分析其对二硫键异构酶酶活性的影响.结果显示:Mt PDI活性结构域中C74、C77位点进行突变后,Mt PDI(C74S)、Mt PDI(C77S)、Mt PDI(C74S/C77S)的还原酶活性都明显降低,分别降低32.2%、40.7%和51.2%,双突变的酶活影响大于单点突变.热处理后,突变体Mt PDI(C74S)、Mt PDI(C77S)、Mt PDI(C74S/C77S)对大肠杆菌的热损伤保护明显低于Mt PDI.本研究表明C74和C77是自养甲烷杆菌二硫键异构酶活性区域关键氨基酸,可为深入研究嗜热古菌二硫键的功能和嗜热自养甲烷杆菌抗胁迫机理提供基础.