科研产出
碰撞诱导裂解-电子转移解离(CID-ETD)质谱对糖基化多肽的分析
《食品科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:采用碰撞诱导裂解-电子转移解离液相串联质谱(LC LTQ-ESI CID/ETD MS-MS)分析胃蛋白酶酶解后的糖基化卵清蛋白肽。结果表明:碰撞诱导裂解一级质谱(CID MS)可以对糖基化多肽进行初步识别和鉴定;碰撞诱导裂解二级质谱(CID MS-MS)可以作为通过裂解多肽链实现部分糖基化肽位点的定位分析,但峰值较小,杂峰较多,形成了部分中性丢失的新峰。电子转移解离二级质谱(ETD MS-MS)比较适合于氨基酸序列长度为中等,带2个电荷的糖基化修饰肽段的裂解,对于较大分子质量的糖基化修饰肽的ETD(电子转移解离)裂解片段较少,判定方面存在一定困难,因此,需要发展碰撞诱导裂解中性丢失三级质谱(CID-NL-MS3)技术对分子质量较大糖基化肽的糖基定位及定性分析。
关键词: 糖基化肽 卵清蛋白 碰撞诱导裂解 电子转移解离 质谱
利用CID MS~3质谱的中性丢失分析多肽糖基化位点
《食品科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:蛋白质糖基化修饰位点的定位分析在糖基化蛋白质研究领域至关重要,本实验建立CID中性丢失引发的多级质谱对多肽糖基化位点分析的方法。以糖基化多肽为研究对象,采用ESI CID MS对Amadori糖基化多肽进行CID多级激发裂解,MS3裂解分别可以由3H2O、3H2O+HCHO的中性丢失引发,根据糖基化肽段的分析鉴定,均可完成对糖基化修饰位点的定位分析,但是在多级质谱分析中,3H2O中性丢失引发的糖基化肽段的鉴定更加精确,且在干热条件下,卵清蛋白中的K227相对K229更易发生糖基化修饰。综上分析,通过CID MS3多步激发质谱技术可以对一糖多肽进行糖基化定位分析。
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