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资源类型

中文期刊 (2 )

收录级别

CSCD (1)

年份

2010 (2)

期刊名称

分子植物育种 (1)
江西农业学报 (1)

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机构

南昌大学 (1)
江西省农业科学院 (1)
江西省农业科学院生物工程中心 (1)

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资源类型: 中文期刊

关键词:反应体系(模糊匹配)

共2条记录

芦笋SRAP反应体系优化及引物筛选

盛文涛; 周劲松; 汤泳萍; 罗绍春; 陈光宇; 《分子植物育种》 2010 CSCD

摘要：本研究以芦笋基因组总DNA为模板,通过对芦笋SRAP反应体系的重要参数进行优化,建立了一套适用于芦笋的SRAP反应体系:25μL的反应体系中,模板DNA量80ng、Mg2+浓度3.0mmol/L、上下游引物各0.2μmol/L、dNTPs0.3mmol/L、Taq DNA聚合酶1U以及1×Buffer。扩增程序为:94℃预变性3min;94℃30s、35℃30s、72℃1.5min,5个循环;然后退火温度提高到50℃,35个循环;最后72℃延伸10min。比较琼脂糖凝胶和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测SRAP扩增产物的多态性,结果发现:6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测扩增产物比琼脂糖的效果好。利用该优化体系筛选引物,从256个SRAP引物组合中筛选出239个,它们具有扩增条带清晰、丰富、重复性好的优点,证明了此优化体系稳定可靠。

关键词：芦笋 SRAP 反应体系 优化引物筛选

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请求原文

芦笋基因组DNA提取与ISSR反应体系的优化

盛文涛; 周劲松; 汤泳萍; 罗绍春; 朱友林; 陈光宇; 《江西农业学报》 2010

摘要：ISSR标记技术在芦笋上目前还未见相关的研究报道。本研究在改进芦笋基因组DNA提取方法基础上,以芦笋基因组总DNA为模板,对芦笋ISSR反应体系的重要参数进行优化试验,建立了一套适用于芦笋稳定可靠、重复性强的ISSR反应体系:25μL的反应体系中,模板DNA量50 ng、Mg2+浓度2.0 mmol/L、正反引物各0.2μmol/L、dNTPs 0.2 mmol/L、TaqDNA聚合酶1 U以及1×Buffer。

关键词：芦笋基因组 ISSR 反应体系 优化