科研产出
基于光谱技术分析不同还原糖对Ara h2糖基化反应的影响
《光谱学与光谱分析 》 2023 EI SCI 北大核心 CSCD
摘要：糖基化反应能诱导食品中蛋白质的结构发生改变；Ara h2是花生中的主要蛋白组分之一，可以作为一种模式蛋白研究花生蛋白糖基化产物的结构变化。不同还原糖对Ara h2糖基化反应的影响目前未见相关报道。以花生蛋白Ara h2为研究对象，通过SDS-PAGE、内源荧光、同步荧光、紫外、圆二色谱、红外等光谱技术研究Ara h2糖基化前后分子量、二级、三级结构以及官能团的变化，分析六种还原糖（核糖、木糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、乳糖）对花生蛋白Ara h2糖基化产物结构的影响，阐明经不同还原糖修饰后花生蛋白Ara h2的结构变化。SDS-PAGE电泳表明木糖和核糖修饰的花生蛋白Ara h2电泳条带明显上移，糖基化程度最大；紫外光谱分析表明糖基化反应会改变花生蛋白Ara h2的吸收峰强度。五碳糖修饰的花生蛋白Ara h2具有最强的吸收强度，其中五碳糖中木糖的吸收峰强度最大；内源荧光、同步荧光和三维光谱实验结果表明，糖基化修饰会使花生蛋白Ara h2的荧光强度降低，且五碳糖修饰的Ara h2荧光强度最低。分析认为由于糖基化修饰使花生蛋白Ara h2的结构展开，导致芳香族氨基酸暴露在水环境中，从而引起荧光猝灭；圆二色谱分析表明不同还原糖修饰的Ara h2糖基化产物α-螺旋含量都增加，其中木糖修饰的α-螺旋含量最大（15.6%）;红外光谱分析表明木糖和核糖修饰的花生蛋白Ara h2的吸收峰分别从3 327.41 cm-1红移至3 318.43和3 321.09 cm-1, 1 700～1 600 cm-1处木糖和核糖修饰的花生蛋白Ara h2吸收峰强度略高于其他还原糖修饰的该蛋白。不同还原糖对Ara h2糖基化反应后的糖基化产物结构的影响不同，还原糖的碳链越短、空间位阻越小，糖基化反应程度越高，对Ara h2的结构影响越大。
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刺葡萄与欧美杂交种葡萄"夏黑"幼叶花色苷比较分析
《中国南方果树 》 2023 北大核心
摘要：刺葡萄(Vitis davidii Fo■是我国重要的野生葡萄资源，常存在于山谷、丘陵一带，其幼叶呈现出明显的紫红色，与欧美杂交种（Vitis vinifera×Vitis labrusca）葡萄“夏黑”（Summer Black）幼叶的朱红色不同。为探明两者幼叶花色苷组成及含量差异，采用高效液相色谱-质谱（HPLC-MS）法对两者幼叶样品进行了测定分析。结果表明，刺葡萄和“夏黑”葡萄幼叶花色苷含量（以幼叶鲜质量计）分别为3 452.16和565.17μg/g,刺葡萄显著高于“夏黑”;刺葡萄幼叶中含量最高的花色苷为芍药花素-3,5-O-二葡萄糖苷，含量为2 219.81μg/g;夏黑葡萄幼叶含量最高的花色苷为芍药花素-3-O-葡萄糖苷，含量为122.40μg/g。二葡萄糖花色苷和单葡萄糖花色苷分别是刺葡萄幼叶和夏黑幼叶花色素糖基化主要类型，刺葡萄幼叶花色素总修饰程度高于夏黑葡萄幼叶。
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光谱技术分析尿素对BSA糖基化反应的影响
《光谱学与光谱分析 》 2021 EI 北大核心 CSCD
摘要：以牛血清白蛋白(BSA)和葡萄糖为原料,采用光谱技术从分子水平上研究不同浓度尿素(0~7 mol·L-1)对BSA糖基化反应的影响.结果表明:BSA经过尿素处理后,其糖基化产物的自由氨基含量和内源荧光强度均显著下降;同步荧光光谱表明BSA与尿素的结合点更接近于色氨酸(Trp)残基;紫外光谱分析表明经尿素处理后BSA的糖基化产物的紫外吸收值均有不同程度的增加;三维荧光光谱表明随着尿素浓度的增加,BSA的最大发射波长产生先红移再蓝移的变化趋势,说明其结构展开,促进了BSA的糖基化反应.结果表明,尿素处理会使BSA的空间结构发生不同程度的伸展,且当尿素浓度为3 mol·L-1时BSA的糖基化反应程度最大.
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LC FT-ICR MS精确分析卵清蛋白在真空干燥过程中的糖基化修饰
《食品工业科技 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：研究了卵清蛋白与葡萄糖混合物在真空干燥的过程中,卵清蛋白的糖基化修饰情况。首次采用胃蛋白酶和液相-傅立叶变换离子回旋共振(LC-FT-ICR)精确质谱分析技术对卵清蛋白的糖基化修饰位点进行研究,其蛋白质覆盖率可以达到100%,研究发现在真空干燥过程中,卵清蛋白中的赖氨酸会与还原糖发生美拉德初级反应,形成糖基化修饰,主要发生在卵清蛋白的K47,56,62,182,190,323和370的赖氨酸氨基上,而卵清蛋白中的精氨酸和氮末端氨基未发现被糖基化修饰;同时,采用离子碰撞诱导解离三级质谱CID-MS3验证m/z7863+的离子峰为m/z7323+的离子峰上添加一个162Da。本论文的研究为精确分析蛋白质修饰的一级结构变化提供了重要的研究方法,为真空干燥在实验分析中的应用提供重要参考。
关键词： 真空干燥 糖基化 卵清蛋白 液相-傅立叶变换离子回旋共振质谱(LCFT-ICRMS) 胃蛋白酶
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