科研产出
鹅星状病毒衣壳蛋白间接ELISA检测方法的建立
《中国预防兽医学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为建立血清中鹅星状病毒(GoAstV)抗体检测的间接ELISA方法,本研究以GoAstV JX01/China/2021株基因组为模板优化并合成ORF2基因(1 bp-630bp),构建重组质粒pColdI-Cap,利用原核表达系统表达GoAstV重组Cap蛋白,以NI-NTA亲和层析柱纯化的重组Cap蛋白作为包被抗原,通过优化各反应条件建立了 GoAstV间接ELISA抗体检测方法.结果显示重组Cap蛋白的最佳包被浓度为2.5 μμg/mL,10%马血清37℃封闭90 min,待检血清稀释度为1:50,孵育时间为37℃45 min,兔抗鹅IgG-HRP工作浓度为1:2 000,37℃孵育60 min.采用建立的间接ELISA方法对鹅细小病毒(GPV)、鹅圆环病毒(GoCV)、禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)、坦布苏病毒(TMUV)、鹅呼肠孤病毒(GRV)、大肠杆菌(E.coli)等鹅源阳性血清进行检测,结果显示仅GoAstV阳性血清为阳性结果,其他病原阳性血清检测结果均为阴性,特异性较强;将GoAstV阳性血清2倍倍比稀释后,利用本实验建立的GoAstV间接ELISA抗体检测方法及病毒中和试验方法同时检测,结果显示该方法的检测下限为1:400,而病毒中和试验的检测下限为1:200,表明该方法的敏感性较高;重复性试验结果显示,批内、批间变异系数均小于10%,重复性较好.利用本实验建立的方法与病毒中和试验同时检测120份鹅血清,结果显示二者的符合率为94.2%,Kappa系数为0.868,表明两种方法一致性良好.利用本研究建立的间接ELISA方法对670份采自江西及周边省份的鹅血清样品进行检测,GoAstV的检出率为32.0%(214/670).本研究建立的检测GoAstV血清抗体的间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可为GoAstV感染的诊断及流行病学调查提供切实可行的方法.
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外源糖原调控猪链球菌基因表达的转录组分析
《微生物学通报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[背景]碳水化合物的利用与猪链球菌在宿主体内的定殖和致病性密切相关.感染期间,宿主细胞释放的糖原可能是猪链球菌重要的碳源.[目的]从转录组学角度解析猪链球菌全基因转录水平对外源糖原诱导的响应,特别是毒力基因.[方法]将猪链球菌2型强毒株分别用糖原和葡萄糖进行液体培养,通过高通量转录组测序,比较分析糖原对猪链球菌代谢通路和毒力基因差异表达的影响,并通过体外试验和攻毒试验进行验证.[结果]猪链球菌在糖原培养基中生长良好.转录组数据显示,糖原培养条件下的猪链球菌共有908个基因差异表达,基因组占比46.07%,其中501个基因上调表达,407个基因下调表达.富集分析结果表明,糖原影响了猪链球菌广泛的基础代谢过程,但糖酵解途径保持稳定.30个毒力基因的表达水平发生变化,重要的毒力因子SLY、ApuA.ArcABC等的基因转录水平大幅度升高(倍数>20).糖原培养后的猪链球菌的溶血活性、黏附和侵入能力显著上升,对受试动物的毒力增强,证实猪链球菌能够响应糖原诱导,糖原能调控猪链球菌的致病性.[结论]外源糖原的利用显著影响了猪链球菌的基因表达谱,这种对碳源的响应是细菌对不断变化的生存环境的适应性,也反映了细菌对碳水化合物的利用与其致病性之间的紧密联系.
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一株猪源化脓隐秘杆菌的鉴定、生物学特性研究与基因组分析
《微生物学通报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：[背景]化脓隐秘杆菌作为一种条件致病菌,常与蓝耳病病毒、猪圆环病病毒、巴氏杆菌等混合感染猪,引起各种非特异性化脓性感染,部分临床症状与副猪嗜血杆菌相似。本试验从江西某猪场一起因呼吸道症状急性死亡病猪的肺脏分离到一株具有β溶血特性、疑似化脓隐秘杆菌的细菌病原。[目的]鉴定该病原的菌属种类、生物学特性及基因组特征,为该菌疾病的基础研究与临床防控奠定理论基础。[方法]采用透射电镜、扫描电镜结合PCR鉴定等方法对菌属种类进行鉴定;通过动物实验、药敏试验,分析菌株的生物学特性;借助全基因组测序、生物信息学等技术发掘该菌的基因组特征。[结果]形态观察、16S rRNA基因鉴定及系统发育分析证实,该分离菌株是化脓隐秘杆菌,命名为JX18;药敏试验表明,该菌株对克林霉素和林可霉素不敏感,对其余所选药物均敏感;动物实验结果显示,对小鼠腹腔攻毒后,小鼠腹部出现明显脓肿病灶,最高剂量组的小鼠全部死亡;全基因组测序结果表明,该菌株携带plo、nanH、nanP、fimA、fimC、fimE等重要毒力基因,并且与其他化脓隐秘杆菌菌株毒力基因的相似性较高;根据同源基因数据库（Cluster of Orthologous Groups,COG）预测,菌株JX18中参与碳水化合物代谢的基因占比最高;通过毒力基因数据库（Virulence Factor Database,VFDB）、UniProtKB/Swiss-Prot 等数据库预测,JX18 菌株基因组中携带有多个组氨酸激酶、反应调节因子等与细菌双组分调控系统相关基因,以及多种与粘附、侵入及分泌系统相关的毒力基因。[结论]在江西省分离鉴定出一株猪源强致病性化脓隐秘杆菌,丰富了猪源化脓隐秘杆菌病原信息,为进一步开展猪源化脓隐秘杆菌相关研究与防控奠定了理论依据。
关键词： 化脓隐秘杆菌 分离鉴定 生物学特性 基因组特征 毒力基因
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J亚群禽白血病病毒致病机理研究进展
《中国兽医学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：J亚群禽白血病病毒（ALV-J）是一种高致癌性反转录病毒,可引发髓性细胞性白血病及各种肿瘤性疾病,并产生免疫抑制,易继发细菌及其他病毒感染。长久以来,禽白血病给养禽业造成了巨大的经济损失,且没有有效的预防和治疗手段,仅依靠禽白血病病毒的净化,仍不能有效控制禽白血病的流行和蔓延。本文主要阐述ALV-J病毒的感染、复制、致瘤及免疫抑制机制、宿主天然抗病毒过程及其分子机制,对需要进一步深入研究的目标和内容提出了展望。
关键词： J亚群禽白血病病毒（ALV-J） 致病机理 免疫抑制 抗病毒免疫
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江西部分地区种鸭坦布苏病毒病及鸭瘟免疫状况调查与分析
《江西农业大学学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】调查江西省部分地区规模化种鸭场鸭坦布苏病毒病和鸭瘟免疫状况。【方法】2020—2021年从江西省的11个规模化种鸭场采集血清样品1 233份,应用酶联免疫吸附试验测定鸭坦布苏病毒病和鸭瘟的抗体水平。【结果】鸭坦布苏病毒病抗体的总阳性率为61.1%,阳性率最高的为E场（80.4%）,11个种鸭场中有8个场的阳性率未达到国家合格率标准。鸭瘟抗体的总阳性率为80.5%,抗体阳性率较高的为I场（90.8%）和H场（88.8%）,11个种鸭场中有2个场的鸭瘟抗体阳性率未达到国家合格率标准。不同季度调查结果显示第四季度鸭坦布苏病毒病和鸭瘟的抗体阳性率最高,第一季度的鸭坦布苏病毒病和鸭瘟抗体阳性率均未达到国家合格率标准。【结论】江西省部分地区规模化种鸭场的鸭坦布苏病毒病和鸭瘟免疫水平不容乐观。尤其是鸭坦布苏病毒病免疫水平较低,建议当地种鸭场加强鸭坦布苏病毒病和鸭瘟的免疫,定期监测抗体水平,优化免疫程序,以提高整个鸭群的保护力。
关键词： 种鸭 鸭坦布苏病毒病 鸭瘟 酶联免疫吸附试验 免疫水平
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新冠肺炎疫情下畜禽疫病防控应急方案
《农村百事通 》 2020
摘要：当前是畜禽疾病多发季节,应加强动物疫病的防控,稳定畜禽生产,以保障肉类食品的稳定供应。现将畜禽养殖过程中的疫病防控技术要点介绍如下:一、完善畜禽生产生物安全体系,建立动物疫病防护网畜禽生产生物安全体系主要是防止病毒、细菌、真菌、寄生虫等致病微生物进入养殖场,感染和威胁畜禽健康所采取的一系列安全
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赣南藏香猪与杜长大商品猪胴体性状和肉品质比较分析
《江西农业大学学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：[目的]研究赣南藏香猪与商品猪在胴体性状和肉品质方面的差异.[方法]选取赣南藏香猪12头,采用放牧饲养为主舍饲补料为辅的饲养模式,杜长大三元商品猪6头,圈养饲喂饲料全价料,分别进行屠宰,测定和计算各项胴体性状和肉品质指标.[结果]1)赣南藏香猪的屠宰率显著低于商品猪(P<0.05),后腿比率显著高于商品猪(P<0.05).2)赣南藏香猪的肉色评分,亮度和红度值及pH24 h值显著高于商品猪(P<0.05),鲜肉剪切力显著小于商品猪(P<0.05).3)赣南藏香猪肌肉水分、肌苷酸含量、SOD活性显著高于商品猪(P<0.05);赣南藏香猪肌肉的呈味氨基酸含量显著高于商品猪(P<0.05);赣南藏香猪肌肉饱和脂肪酸显著低于商品猪(P<0.05),不饱和、单不饱和脂肪酸显著高于商品猪(P<0.05).4)赣南藏香猪的肌纤维直径显著低于商品猪(P<0.05),肌纤维密度显著高于商品猪(P<0.05).[结论]赣南藏香猪屠宰性能更优,肉色更红亮,肉质更加细嫩、多汁,滋味更佳,肌肉抗氧化性能更好,更耐贮藏.
关键词： 赣南藏香猪 杜长大商品猪 胴体性状 肉品质 抗氧化特性
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江西省5个规模化猪场健康猪群中猪链球菌的流行病学调查及耐药性研究
《江西农业大学学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：[目的]调查猪链球菌在江西省规模化猪场的临床健康猪群中的流行现状和耐药情况.[方法]选取2017-2019年江西省的5个规模化猪场为采样点,采集表观健康猪群鼻拭子314份,采用选择性培养基与分子生物技术的方法进行猪链球菌的分离鉴定,并通过Kerby-Bauer纸片扩散法测定分离菌株对16种抗生素的耐药性.[结果]分离鉴定出猪链球菌112株;表观健康猪群中的猪链球菌总检出率为35.67%,各个规模化猪场的检出率统计学差异显著;未检测出猪链球菌2型,检出率0%;50%以上的猪链球菌菌株对克林霉素、四环素、红霉素和克拉霉素等耐药,90%以上的猪链球菌菌株对万古霉素、青霉素G和米诺环素高度敏感;菌株的耐药谱以多重耐药为主,甚至分离到耐11种和12种抗生素的猪链球菌菌株;不同地域猪场猪链球菌的耐药性和耐药谱差别较大.[结论]猪链球菌在江西省内的规模化猪场中流行率较高,青霉素是目前理想的治疗或预防猪链球菌病的首选药物,但是目前猪链球菌的耐药情况,特别是多重耐药情况已相当严峻,迫切需要引起从业人员的重视,建立完善合理的猪链球菌病防控方案.
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江西部分地区临床健康猪群中副猪嗜血杆菌的血清型鉴定及耐药性调查
《江西农业大学学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：[目的]调查江西省部分地区临床健康猪群中副猪嗜血杆菌的优势血清型及耐药现状.[方法]2018—2019年从江西几个规模化猪场的临床健康猪群中采集114份鼻腔棉拭子,通过菌落形态观察和PCR方法分离副猪嗜血杆菌,进行血清分型鉴定,应用Kerby-Bauer纸片扩散法测定分离菌株对17种抗生素的耐药性.[结果]共检出13株副猪嗜血杆菌,检出率为11.40%;通过PCR的方法确定江西省地区流行的优势菌株为血清13型,占比46.15%,其次分别是不可分型菌株(38.46%)、血清5型(7.69%)和血清11型(7.69%);13株副猪嗜血杆菌分离株对氨基糖苷类抗菌药(卡那霉素、链霉素)、大环内酯类抗菌药(麦迪霉素)、氨苄西林、哌拉西林耐药率较高,而对喹诺酮类抗菌药(氧氟沙星)和头孢类抗菌药敏感率可达100%;多重耐药现象突出,以3重、4重耐药菌株为主.[结论]江西省部分地区规模化猪场当前流行的副猪嗜血杆菌优势血清型为13型,头孢类、喹诺酮类抗菌素是防控副猪嗜血杆菌病发生的有效药物.目前副猪嗜血杆菌的耐药情况比较严重,猪场应多方面做好副猪嗜血杆菌的防控工作,建立完善合理的细菌病防控方案.
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