科研产出
60Co-γ辐照对卵清蛋白糖基化体系结构和糖基化产物的影响
《中国食品学报 》 2024 EI 北大核心 CSCD
摘要：为探究60Co-γ辐照对糖基化体系结构和糖基化产物的影响,以卵清蛋白(OVA)-葡萄糖体系为研究对象,经0,25,50,75,100 kGy的60Co-γ辐照后,采用SDS-PAGE、荧光光谱、圆二色谱测定其分子质量、三级结构及二级结构的变化.借助高效液相色谱法、紫外光谱法测定其体系内产生的有害糖基化产物(果糖胺、丙烯酰胺、荧光性AGEs、戊糖素、类黑精)的含量.OVA分子质量和表面疏水性的增加、内源荧光强度和α-螺旋含量的降低、β-结构(β-折叠和β-转角)含量的增加表明,60Co-γ辐照呈剂量依赖性,促进了 OVA与葡萄糖的糖基化反应.此外,60Co-γ辐照后体系内产生的果糖胺、丙烯酰胺的含量呈现先上升后下降的趋势,在辐照剂量为50 kGy时达到最大值.荧光性AGEs、戊糖素、类黑精的含量以剂量依赖性方式增加.综合来看,为了减少辐照加工过程中蛋制品内有害糖基化产物的含量,提高其安全性,需将60Co-γ辐照的剂量控制在25 kGy以内.本研究结果为未来扩展食品辐照技术在蛋制品方面的应用提供一定的科学依据.
关键词： 卵清蛋白 60Co-γ辐照 糖基化体系 结构 糖基化产物
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碰撞诱导裂解-电子转移解离(CID-ETD)质谱对糖基化多肽的分析
《食品科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：采用碰撞诱导裂解-电子转移解离液相串联质谱(LC LTQ-ESI CID/ETD MS-MS)分析胃蛋白酶酶解后的糖基化卵清蛋白肽。结果表明:碰撞诱导裂解一级质谱(CID MS)可以对糖基化多肽进行初步识别和鉴定;碰撞诱导裂解二级质谱(CID MS-MS)可以作为通过裂解多肽链实现部分糖基化肽位点的定位分析,但峰值较小,杂峰较多,形成了部分中性丢失的新峰。电子转移解离二级质谱(ETD MS-MS)比较适合于氨基酸序列长度为中等,带2个电荷的糖基化修饰肽段的裂解,对于较大分子质量的糖基化修饰肽的ETD(电子转移解离)裂解片段较少,判定方面存在一定困难,因此,需要发展碰撞诱导裂解中性丢失三级质谱(CID-NL-MS3)技术对分子质量较大糖基化肽的糖基定位及定性分析。
关键词： 糖基化肽 卵清蛋白 碰撞诱导裂解 电子转移解离 质谱
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LC FT-ICR MS精确分析卵清蛋白在真空干燥过程中的糖基化修饰
《食品工业科技 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：研究了卵清蛋白与葡萄糖混合物在真空干燥的过程中,卵清蛋白的糖基化修饰情况。首次采用胃蛋白酶和液相-傅立叶变换离子回旋共振(LC-FT-ICR)精确质谱分析技术对卵清蛋白的糖基化修饰位点进行研究,其蛋白质覆盖率可以达到100%,研究发现在真空干燥过程中,卵清蛋白中的赖氨酸会与还原糖发生美拉德初级反应,形成糖基化修饰,主要发生在卵清蛋白的K47,56,62,182,190,323和370的赖氨酸氨基上,而卵清蛋白中的精氨酸和氮末端氨基未发现被糖基化修饰;同时,采用离子碰撞诱导解离三级质谱CID-MS3验证m/z7863+的离子峰为m/z7323+的离子峰上添加一个162Da。本论文的研究为精确分析蛋白质修饰的一级结构变化提供了重要的研究方法,为真空干燥在实验分析中的应用提供重要参考。
关键词： 真空干燥 糖基化 卵清蛋白 液相-傅立叶变换离子回旋共振质谱(LCFT-ICRMS) 胃蛋白酶
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