科研产出
辣椒土传病原菌三重PCR检测体系的建立与应用
《南方农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：【目的】建立简便、快速、准确同时检测辣椒疫霉（Phytophthora capsici）、白绢病菌（Sclerotium rolfsii）和青枯病菌（Ralstonia solanacearum）的多重PCR检测体系，为辣椒多种土传病害同时早期诊断提供技术支撑。【方法】以3种辣椒土传病害病原菌辣椒疫霉、白绢病菌和青枯病菌为研究对象，参考相关文献筛选出3种病原菌的3对特异性引物PCA1F/PCA1R、SCR-F/SCR-R和RalfliC-F/RalfliC-R，以引物浓度、退火温度、循环次数及延伸时间为变异因子，探索最佳反应体系，建立三重PCR检测方法，并基于田间实际发病样品对方法进行验证。【结果】优化的三重PCR反应体系25.0μL:3对引物PCA1F/PCA1R、SCR-F/SCR-R和RalfliC-F/RalfliC-R浓度分别为0.24、0.24和0.28μmol/L,DNA模板各10 ng,2×Multiplex PCR Mix 12.5μL,ddH2O补足至25.0μL。最佳扩增程序：94℃预变性1 min;94℃30 s,55.8℃30 s,72℃45 s，进行35个循环；72℃延伸10 min。建立的三重PCR体系可分别扩增出352、540和724 bp的特异性目的片段，体系灵敏度达10-1ng/μL。利用建立的反应体系，对来自江西省不同市（县）的54份辣椒和土壤样品进行检测，样品检出率为100%。【结论】建立的三重PCR检测体系可对辣椒田间发病植株和土壤中辣椒疫霉、白绢病菌和青枯病菌进行快速、准确检测，可应用于辣椒多种土传病害并发的早期预防和流行监测。
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江西省番茄绵疫病菌对嘧菌酯的敏感性检测及抗性风险分析
《农药学学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为明确番茄绵疫病菌对嘧菌酯的敏感性,采用菌丝生长速率法测定了2018—2019年从江西省番茄主产区采集分离得到的58株绵疫病菌Phytophthora capsici对嘧菌酯的敏感性,并以敏感菌株YD5为亲本,通过紫外线诱导获得了4株抗性突变体,研究了突变体的生物学性状;进而采用菌丝生长速率法测定了敏感菌株YD5及其4个抗性突变体对烯酰吗啉和甲霜灵的EC50值,分析嘧菌酯与烯酰吗啉和甲霜灵是否存在交互抗性.结果表明:嘧菌酯对绵疫病菌菌丝生长有较强的抑制作用,其对58个绵疫病菌的EC50值介于0.1867~1.6239μg/mL之间,平均EC50值为(0.8606±0.3318)μg/mL,58个菌株对嘧菌酯的敏感性频率分布呈正态分布,表明番茄绵疫病菌对嘧菌酯仍然较为敏感.通过紫外线诱导获得4个抗性突变体,突变体的抗药性能够稳定遗传,且在致病力与游动孢子萌发率方面与亲本菌株无显著差异,产孢量较亲本菌株显著下降.嘧菌酯与烯酰吗啉和甲霜灵之间均不存在交互抗药性.研究表明,番茄绵疫病菌对嘧菌酯具有中等抗性风险,一旦田间出现抗性菌株,应立即采取措施控制菌群的转移扩散.同时,需加强番茄绵疫病菌对嘧菌酯的田间抗性监测,在生产过程中轮用或混用不同作用机制的药剂,以避免或延缓抗药性的发展.
关键词： 辣椒疫霉 嘧菌酯 敏感性 交互抗性 抗性风险 生物学特性
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辣椒疫霉不同发育阶段对氟吗啉的敏感性研究
《中国农学通报 》 2016 CSCD
摘要：从江西省各地采集分离获得108个辣椒疫霉菌株,通过菌丝生长法等测定了辣椒疫霉菌的不同生长阶段对氟吗啉的敏感性。研究结果表明,氟吗啉对辣椒疫霉菌的不同生长发育阶段的抑制作用明显,辣椒疫霉菌丝生长对氟吗啉的敏感性较高,EC50值范围为0.07852~0.38622μg/m L,平均EC50值为0.18159μg/m L;游动孢子囊形成对氟吗啉的敏感性更高,EC50值范围为0.00251~0.03943μg/m L,平均EC50值为0.01588μg/m L;游动孢子萌发对氟吗啉的敏感性最高,EC50值范围为0.00156~0.00965μg/m L,平均EC50值为0.00515μg/m L。正态分析表明,辣椒疫霉菌108个菌株的3个发育阶段对氟吗啉的敏感性符合正态分布,江西省内目前还不存在耐药性的辣椒疫霉群体。
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江西省辣椒疫霉生理小种构成及其对烯酰吗啉的敏感性分析
《植物保护学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了明确江西省辣椒疫霉对烯酰吗啉的抗药性风险,采用灌根法鉴定了108个江西辣椒疫霉菌株的生理小种,并采用菌丝生长速率法测定了江西省辣椒疫霉对烯酰吗啉的敏感性。结果表明,菌株LP20、LP38和LP48属于生理小种3,占测定菌株总数的2.8%,其余菌株属于生理小种2,占测定菌株总数的97.2%,为优势生理小种,且未发现生理小种1。烯酰吗啉抑制辣椒疫霉菌丝生长的EC50值范围为0.1149~0.2868μg/mL,最不敏感菌株的EC50值为最敏感菌株的2.49倍。不同地区的菌株对烯酰吗啉的敏感性差异不大,崇义的菌株平均EC50值最低,为0.1367μg/mL,分布范围为0.1213~0.1462μg/mL;吉水的菌株平均EC50值最高,为0.2185μg/mL,分布范围为0.1805~0.2835μg/mL。
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辣椒疫霉菌对甲霜灵的敏感性测定
《江西农业大学学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：采用菌丝生长速率法测定江西省不同地区108株辣椒疫霉病菌对甲霜灵的敏感性。其结果表明,EC50值为0.189 0～0.741 3μg/mL,平均EC50为(0.418 3±0.012 0)μg/mL,最不敏感菌株是最敏感菌株的3.92倍。108株菌株对甲霜灵的敏感性分布呈单峰曲线,未出现抗药性病原菌亚群体。根据总体平均值,其中吉水、南昌、上犹、崇义、九江、宜丰、乐平相对来说,其敏感性较差。平均EC50值最低的菌株来自吉安,为0.282 4μg/mL,分布范围为0.245 8～0.320 8μg/mL,平均EC50值最高的菌株来自九江,为0.472 1μg/mL,分布范围为0.331 1～0.545 1μg/mL。来自永丰的菌株,虽然平均EC50较低,但其最高EC50值为最低的2.43倍;来自上犹、宜丰、乐平的菌株其最高EC50值分别为最低的3.35、2.96、2.44倍,说明同一地区的菌株其抗药性也存在不同程度的差异。
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