科研产出
FST对猪卵巢颗粒细胞增殖凋亡及激素分泌的影响
《畜牧兽医学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：旨在明确卵泡抑素(follistatin, FST)对猪卵巢颗粒细胞增殖、凋亡和激素分泌的影响，以期为探讨FST在猪卵泡生长过程中发挥的作用提供科学依据。本研究以永生化猪卵巢颗粒细胞为试验材料，将细胞分为过表达对照组、过表达组、干扰对照组和干扰组共4个试验组，每个试验组设置3个重复孔，根据FST基因的mRNA序列构建过表达质粒和设计siRNA,通过将其转染至颗粒细胞中，验证过表达及抑制效果。使用CCK-8和流式细胞法分析转染24、48和72 h后颗粒细胞增殖及凋亡情况，ELISA法检测细胞中雌二醇和孕酮含量变化，并进一步利用RT-PCR和WB法分别检测此过程中增殖、凋亡和激素合成相关基因的mRNA和蛋白表达水平。结果表明，构建的过表达质粒和siRNA可显著改变细胞中FST的表达水平(P<0.01),且转染至猪卵巢颗粒细胞后，FST抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，并可显著降低细胞中增殖凋亡相关基因FSHR、GDF9、BCL2、CDKN1B的mRNA(P<0.05)和蛋白表达水平(P<0.01)。而干扰FST后，卵巢颗粒细胞中雌二醇和孕酮的含量极显著增加(P<0.01),且STAR、CYP11A1、CYP19A1、3β-HSD、17β-HSD等激素合成相关基因的mRNA和蛋白表达量同样极显著升高(P<0.01)。综上所述，在猪卵巢颗粒细胞中，FST基因表达水平的降低可有效促进细胞的增殖及雌二醇和孕酮的分泌，这一作用发挥可能与上调增殖凋亡相关基因和激素合成限速酶的表达有关。
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DIRAS3诱导猪子宫内膜上皮细胞自噬及对容受性相关基因表达的影响
《江西农业大学学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】旨在探究DIRAS3对猪子宫内膜上皮细胞自噬的调控作用，并分析其对子宫内膜上皮细胞增殖凋亡及子宫内膜容受性相关基因表达的影响，为揭示DIRAS3在猪胚胎附植过程中发挥的功能提供科学依据。【方法】通过构建DIRAS3基因慢病毒载体感染猪子宫内膜上皮细胞，利用Realtime PCR方法检测自噬标志基因LC3-Ⅱ和P62、自噬调节因子mTOR及子宫内膜容受性相关基因COX2、HOXA10、LIF和MSX1的表达水平，并利用CCK-8与流式细胞法分别检测细胞增殖、细胞凋亡情况。【结果】在猪子宫内膜上皮细胞中，DIRAS3可上调LC3-Ⅱ的表达，下调P62的表达，诱导自噬的发生。同时，转染慢病毒干扰载体至子宫内膜上皮细胞发现，DIRAS3表达的抑制，可明显促进细胞中mTOR表达，并诱导细胞增殖，降低细胞凋亡率，且可极显著提高COX2、HOXA10和LIF的表达水平，降低MSX1的表达水平，而此过程中添加雷帕霉素（mTOR抑制剂）处理阻断mTOR通路后，子宫内膜上皮细胞中自噬水平无明显变化，且DIRAS3调控细胞增殖凋亡和容受性相关基因表达的能力受到抑制。【结论】DIRAS3可能通过参与调控mTOR介导的细胞自噬从而影响子宫内膜容受性的建立，进而在猪胚胎附植中发挥重要功能。
关键词： 猪 DIRAS3 子宫内膜上皮细胞 细胞自噬 子宫内膜容受性
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猪ISG15基因表达、多态性及其与繁殖性状的关联分析
《江西农业大学学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]明确干扰素刺激基因15(ISG15)在猪不同妊娠时期母胎界面中的表达规律,分析ISG15基因多态位点在中外猪种中的遗传多样性及与繁殖性状的关联性,拟为揭示ISG15基因在猪繁殖功能中发挥的作用提供重要数据.[方法]利用实时荧光定量PCR方法检测ISG15基因在大白猪妊娠15,26,50 d子宫内膜和绒毛膜中的表达水平变化,通过测序比对筛选ISG15基因多态位点,采用PCR-RFLP方法检测多态位点在大白、梅山猪、清平猪、通城猪、大花白猪中的遗传多样性,并利用SPSS19.0分析ISG15基因多态位点与繁殖性状的关联性.[结果]ISG15基因在妊娠26 d子宫内膜和绒毛膜组织中表达水平均显著高于妊娠50 d(P<0.01),并于第二外显子中存在一个NM_001128469.3:c.301A>G同义突变位点.该位点在5个猪品种群体中均处于Hardy-Weinberg平衡状态,但在地方猪种中,c.301A>G位点处于低度多态,以AA基因型为主,而在大白群体中,c.301A>G位点则处于中度多态,以AG基因型为主.进一步进行繁殖性状关联分析,结果显示,在大白经产母猪群体中,AA基因型母猪在总产仔数和产活仔数方面均显著高于AG基因型和GG基因型母猪(P<0.05).[结论]ISG15基因在妊娠早期母胎界面中表达,其c.301A>G位点基因型在中外猪种中呈差异分布,且与产仔数性状显著性相关,暗示ISG15基因可能参与猪产仔数性状的调控.
关键词： 猪 ISG15基因 表达水平 遗传多样性 关联分析
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DIRAS3基因在猪子宫内膜组织中的表达及其对胚胎附植数的影响
《黑龙江畜牧兽医 》 2021 北大核心
摘要：为了探讨DIRAS3基因在附植期猪子宫内膜组织中的表达情况及其对胚胎附植数的影响,试验采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学方法分析了DIRAS3基因在妊娠第15,26,50天大白猪子宫内膜组织中的表达和定位情况,并通过小鼠腹腔注射试验检测DIRAS3基因对胚胎附植数的影响。结果表明:妊娠第15天大白猪子宫内膜组织中DIRAS3基因的相对表达量极显著高于妊娠第26,50天（P<0.01）,且阳性信号主要集中在子宫内膜腔上皮细胞中,在子宫腺体上皮细胞中有零星分布;而在妊娠第26,50天中,子宫内膜腔上皮细胞中均未观察到明显阳性信号,仅在子宫腺体上皮细胞中存在零星分布。小鼠腹腔注射DIRAS3单克隆抗体后,小鼠胚胎附植数显著减少（P<0.05）。说明妊娠过程中DIRAS3基因在附植期子宫内膜中呈现高水平表达,且可能参与胚胎附植过程的调控。
关键词： 猪 DIRAS3基因 子宫内膜 附植期 胚胎附植数
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猪USP18基因表达规律及其与产仔数性状 的关联分析
《南方农业学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：[目的]明确泛素特异性蛋白酶18基因(USP18)在猪不同妊娠时期子宫内膜中的表达规律及其与雌激素和孕激素的关系,并分析其多态性与产仔数性状的关联性,为揭示USP18基因在猪妊娠过程中的作用机理提供参考依据.[方法]PCR扩增猪USP18基因编码区(CDS)序列及开展相关生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR检测USP18基因在梅山猪和大白猪妊娠15、26和50 d子宫内膜中的表达水平,通过体外细胞试验检测分析雌二醇和孕酮联合处理对子宫内膜上皮细胞USP18基因表达的影响,并采用PCR-RFLP和SPSS 19.0检测猪USP18基因多态性与产仔数性状的关联性.[结果]猪USP18基因CDS序列为966 bp,共编码322个氨基酸残基,编码蛋白分子量为37 kD,理论等电点(pI)为6.74;猪USP18氨基酸序列与牛USP18氨基酸序列的同源性为82%,二者的遗传距离最近.USP18基因在妊娠15和26 d梅山猪和大白猪子宫内膜中的相对表达量均明显高于妊娠50 d,且在妊娠26和50 d,USP18基因在梅山猪子宫内膜组织中的相对表达量显著高于在大白猪子宫内膜组织中的相对表达量(P<0.05,下同).以10-10 mol/L雌二醇和10-8 mol/L孕酮联合处理子宫内膜上皮细胞,USP18基因在子宫内膜上皮细胞中的相对表达量呈上调趋势,且显著高于激素处理前的相对表达量.在猪USP18基因CDS序列953 bp处存在1个SNP位点(T/G错义突变),其不同基因型与产仔数性状的关联分析结果表明,在经产母猪中,TG基因型母猪产活仔数最多,GG基因型母猪产活仔数最少,且差异显著.[结论]猪USP18基因在附植期子宫内膜中高水平表达,且在子宫内膜上皮细胞中的表达受雌激素和孕激素诱导,表明USP18基因在妊娠早期建立过程中发挥着重要作用.USP18基因在梅山猪和大白猪间的差异表达可能是导致梅山猪产仔数高于大白猪的一个重要因素.
关键词： 猪 USP18基因 子宫内膜 上皮细胞 妊娠 激素
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白术对猪O型口蹄疫疫苗免疫效果及抗氧化性的影响
《猪业科学 》 2019
摘要：为提高猪O型口蹄疫疫苗的免疫效果,将试验猪分为5组,在免疫口蹄疫疫苗前分别饲喂基础日粮、添加了0.5%粉碎白术、1.0%粉碎白术、0.5%煎煮白术、1.0%煎煮白术的试验日粮,然后对各组猪进行口蹄疫的常规免疫,首免前和二免后3周后分别采血测定口蹄疫抗体水平.结果表明,首免前各试验组猪与对照组相比,除饲喂1.0%粉碎白术组外,口蹄疫抗体水平与对照组相比差异均不显著(P> 0.05),且低于试剂盒0.4的阳性标准,二免后3周的测定结果表明,0.5%水平的粉碎白术和0.5%煎煮白术均较对照组显著提高了口蹄疫的抗体水平(P <0.05),试验中未见明显不良反应,对试验猪体增重的影响也不大;此外,首免前饲喂1.0%粉碎白术组的抗体水平均值为0.409,高于试剂盒0.4的阳性标准,且显著高于对照组(P<0.05),二免后3周该组的均值为0.384,低于试剂盒0.4的阳性标准,与对照组差异不显著(P>0.05).总之,0.5%的煎煮或粉碎白术添加到基础日粮饲喂10 d,可显著提高O型口蹄疫疫苗二免后3周的口蹄疫抗体水平,生产中母源抗体对口蹄疫疫苗免疫失败的影响也值得重视.
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中草药在猪生产中的应用研究进展
《猪业科学 》 2018
摘要：中草药具有提高猪生长性能和繁殖性能,增强猪免疫性能和改善肉品质的作用,而且中草药毒副作用小,在动物体内易被分解,无残留,不会对环境造成污染。因此,中草药可以作为一种安全、绿色添加剂在猪生产中进行应用。
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