科研产出
利巴韦林干预对肉鸡肠道微生物群落结构的影响
《南方农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探讨矮脚黄鸡口服利巴韦林后其肠道微生物群落结构多样性的变化情况,揭示抗病毒药物对动物肠道健康的影响机制,为科学禁用抗生素及开发绿色生态饲料提供理论依据。【方法】90日龄矮脚黄鸡按10 mg/kg的剂量连续口服利巴韦林溶液7 d（试验组）,以口服等量生理盐水为对照组,停药后收集4 h内的新鲜鸡粪。通过粪便基因组提取试剂盒提取鸡粪总DNA,根据细菌16S rDNA序列V3～V4可变区,设计通用引物338F和806R进行PCR扩增,然后参照Illumina MiSeq平台上机说明进行Illumina MiSeq高通量测序。【结果】从16个矮脚黄鸡粪便样品中共获得614626条原始序列（Raw reads）,经质量控制后获得606862条优质序列（Clean reads）,按97%的序列相似度进行OTU聚类分析获得968个OTUs,对照组和试验组共享624个OTUs。矮脚黄鸡肠道微生物群落丰富度指数（Chao1和ACE）表现为对照组显著（P<0.05,下同）或极显著（P<0.01,下同）高于试验组;在物种多样性方面,Simpson指数的组间差异不显著（P>0.05）,Shannon指数则表现为试验组显著高于对照组。对照组和试验组的矮脚黄鸡粪便样品均以厚壁菌门、放线菌门、拟杆菌门和变形菌门为优势菌门,相对丰度均在5.00%以上;在属分类水平上,相对丰度大于0.10%的属共有108个,对照组和试验组均以乳杆菌属相对丰度最高,分别为34.07%和19.26%。矮脚黄鸡口服利巴韦林后,肠道中的乳杆菌属、肠球菌属、Paeniglutamicibacter、Tessaracoccus、埃希氏杆菌属、副球菌属、Gottschalkia及黄杆菌属呈显著或极显著下降趋势,而拟杆菌属、葡萄球菌属、叠球菌属、Jeotgalicoccus、Unclassifiedfrikenellaceae、Unclassifierobacteroidales、RikenellaceaeRC9gutgroup、明串珠菌属及丹毒丝菌属呈显著或极显著上升趋势。UniFrac-PCoA分析发现,第一主成分（PC1）和第二主成分（PC2）的贡献率分别为73.44%和6.99%,对照组和试验组间的微生物群落结构差异明显,彼此间可较好地区分开,但同处理组内的8个样品能很好地聚在一起,菌群相似度很高。【结论】口服利巴韦林会显著影响矮脚黄鸡肠道微生物区系,改变肠道微生物的稳态结构,进而导致其肠道健康受到损伤。
关键词： 矮脚黄鸡 利巴韦林 肠道微生物 丰富度 多样性 Illumina MiSeq高通量测序
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UPLC-MS/MS法测定利巴韦林及主要代谢物在肉鸡组织中的残留
《中国家禽 》 2020 北大核心
摘要：试验旨在研究利巴韦林及其主要代谢物1H-1,2,4-三氮唑-3-甲酰胺(TCONH2)在肉鸡组织中的残留消除规律.90只矮脚黄鸡随机分为9组,根据10 mg/kg体重剂量连续7d口服利巴韦林溶液.停药后采集胸肉、腿肉和肝脏样品,采用改进的UPLC-MS/MS方法进行检测.结果 显示:该方法操作简单、耗时短、回收率高,可与内源性干扰物尿苷分开,能对低水平利巴韦林和TCONH2进行定量分析检测;胸肉、腿肉和肝脏中利巴韦林和TCONH2平均加标回收率分别为102.2%~110.2%和91.8%~112.6%,相对标准偏差范围为2.4%~7.9%;当停药0.25 d后,利巴韦林和TCONH2在胸肉、腿肉和肝脏中残留量最高,且在肝脏中消除速率较慢,停药21d后仍可在肝脏中检出TCONH2残留.研究提示肝脏是监测TCONH2残留的最佳靶组织,结果对于深入了解利巴韦林在肉鸡体内残留代谢规律和提供畜禽产品质量安全监管方法具有十分重要的参考价值.
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超高效液相色谱-串联质谱法测定畜禽毛发中利巴韦林及其代谢物
《分析试验室 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：建立了一种测定畜禽毛发中利巴韦林及其代谢物1H-1,2,4-三氮唑-3-甲酰胺(TCONH_2)残留的检测方法。1%十二烷基硫酸钠清洗毛发,2%甲酸-甲醇(2:98,V/V)溶液提取,~(13)C-利巴韦林(~(13)CRBV)内标法定量,乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)和十八烷基硅烷(C18)基质分散净化,Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱分离,电喷雾串联质谱多反应监测模式测定。利巴韦林和TCONH_2在毛发中线性关系良好(R~2> 0.99)在2,10,100μg/kg 3个添加水平下利巴韦林和代谢物TCONH_2的回收率分别为101.5%～108.5%和98.5%～101.5%相对标准偏差均小于7%,检出限和定量限分别为0.2μg/kg和0.5μg/kg。该方法适合于畜禽毛发中违禁抗病毒药物利巴韦林及其代谢物TCONH_2的测定。
关键词： 利巴韦林 毛发 超高效液相色谱串联质谱
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